BAALC转录本1-6-8逆转录病毒表达载体的构建

• 作者: 史鹏程 周淑芸 宋小燕 张妍琰 徐兵 萧平难 陈国枢
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: BAALC TA克隆 双酶切 逆转录病毒载体
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1514-1516
• 分类号: R3
• 字数: 2827字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2010.12.004

摘要

目的 构建含BAALC(brain and acute leukemia, cytoplasmic)1-6-8转录本的逆转录病毒表达载体.方法 从KASUMI-1细胞株中提取mRNA,应用RT-PCR技术扩增BAALC 1-6-8获得目的 基因,选用pMDTM18-T Vector做TA克隆.分别双酶切TA克隆获得的阳性质粒和pcDNATM3.1/myc-His A+质粒,琼脂糖电泳纯化回收前者的小片段和后者的大片段,应用T4连接酶连接后转化至E.coli DH5α中.PCR扩增BAALC-myc-His基因序列,双酶切PCR产物和pLXSN载体,T4连接酶连接后转化至E.coli DH5α中,挑选阳性克隆,PCR、双酶切及测序鉴定.结果 PCR分别扩增TA克隆产物和重组pcDNATM3.1/myc-His A+-BAALC,在535 bp处均可见一清晰的特异性扩增条带,显示TA克隆及重组真核表达载体成功;PCR扩增pLXSN-BAALC-His大小为664 bp,双酶切及测序结果证实目的 基因片段正确插入到逆转录病毒表达载体pLXSN中.结论 分离得到了BAALC 1-6-8转录本基因,并成功构建了pLXSN-BAALC-His表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐兵	南方医科大学南方医院血液科	62	219	8.0	10.0
2	宋小燕	南方医科大学南方医院血液科	22	59	5.0	6.0
3	陈国枢	南方医科大学南方医院血液科	6	9	1.0	2.0
4	周淑芸	南方医科大学南方医院血液科	42	107	6.0	9.0
5	萧平难	南方医科大学南方医院血液科	4	9	1.0	3.0
6	史鹏程	南方医科大学南方医院血液科	15	33	4.0	5.0
7	张妍琰	南方医科大学南方医院血液科	5	17	2.0	4.0