猪圆环病毒2型ORF2-ORF1串联基因的原核表达及活性分析

• 作者: 侯喜林 倪宏波 冉旭华 朴范泽 李冬野 李晓娟 李树东 杨焕民 王密 邵磊 闻晓波
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 ORF2 ORF1 表达
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 41-44
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2785字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2010.02.009

摘要

为探讨原核表达的PCV-2 ORF2-ORF1串联蛋白的抗原性及其作为基因工程亚单位疫苗的可能性,以构建好的PCV-2大庆分离株质粒pMD-18T/PCV-2为模板,PCR分别扩增去掉核定位信号的Cap蛋白基因(dNLS-ORF2)和Rep蛋白基因(ORF1),将其串联克隆到原核表达载体pET30a(+)上,经PCR、酶切和测序鉴定,成功构建了重组质粒pET30a-ORF2/ORF1.转化E.coli BL21(DE3)pLysS感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳与Western blot分析.纯化的重组蛋白与PCV-2阳性血清发生特异性反应,并能与免疫小鼠的抗血清发生特异性反应.重组蛋白具有较好的免疫学活性,为基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础.