靶向COX-2基因的microRNA真核表达载体的构建及其活性鉴定

• 作者: 刘诚袆 王雷 王震 田纪伟 董双海 赵庆华
• 来源期刊: 中国矫形外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 环氧化酶 软骨 microRNA RNA 小分子干扰
• 年，卷（期）: 2010,（16）
• 页码范围: 1374-1378
• 分类号: R687
• 语种: 中文

摘要

[目的]构建靶向COX-2基因的microRNA真核表达载体,评估其转染人喉癌细胞株Hep-2细胞后对COX-2基因的干扰效果.[方法]根据COX-2 mRNA序列设计合成4对microRNA片段,定向克隆到pcDNA6.2GW/EmGFPmiR真核表达载体上,采用测序分析鉴定插入序列的完整性;并将其转染至Hep-2细胞株中.采用实时荧光定量PCR检测其对COX-2基因表达的干扰效果以得到最佳干预效果的RNAi片段.[结果]构建的4组重组体插入片段的碱基序列完全正确.4组microRNA片段对Hep-2细胞中COX-2基因mRNA表达水平均有下降.其中COX-2 mi-1组的表达水平最低.[结论]从构建的4组COX-2 microRNA重组体中成功的筛选出最佳干扰靶点质粒,即COX-2 mi-1组,为应用microRNA靶向COX-2的基因治疗的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵庆华	上海交通大学附属第一人民医院骨科	79	534	13.0	19.0
2	董双海	上海交通大学附属第一人民医院骨科	41	424	13.0	19.0
3	田纪伟	上海交通大学附属第一人民医院骨科	100	1002	17.0	26.0
4	王雷	上海交通大学附属第一人民医院骨科	121	1119	17.0	26.0
5	王震	上海交通大学附属第一人民医院骨科	26	116	6.0	9.0
6	刘诚袆	上海交通大学附属第一人民医院骨科	1	2	1.0	1.0