靶向大鼠TGF-β1基因shRN A真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 张千 邓存良 都泓莲
• 来源期刊: 生物医学工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 肝纤维化 TGF-β1 RN A干扰 质粒 基因重组
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 93-97
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 3407字
• 语种: 中文

摘要

构建并鉴定靶向大鼠TGF-β1基因的短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）真核表达载体，为探索肝纤维化的基因治疗提供有力工具。根据大鼠TGF-β1基因的mRNA序列设计并合成2条编码shR-NA的特异性寡核苷酸片段，另选通用阴性对照序列HK，将上述片段退火后分别克隆入线性化质粒载体PGenesil-1．1中，构建出含靶基因片段的shRNA真核表达载体PGenesil-TGF-β1-A、PGenesil-TGF-β1-B及PGenesil-HK，行酶切鉴定及测序分析，并采用脂质体介导法体外转染Hela细胞，荧光显微镜观察转染结果。经酶切和测序鉴定证实，构建的shRNA成功插入到载体，重组质粒的插入序列与设计的靶基因片段完全一致，3种重组质粒均能转染入Hela细胞表达绿色荧光。成功构建出靶向大鼠TGF-β1基因的shRNA真核表达载体，为后续研究抗肝纤维化的基因药物奠定了实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓存良	泸州医学院附属医院感染病科	126	619	12.0	16.0
2	都泓莲	泸州医学院附属医院感染病科	8	19	2.0	4.0
3	张千	泸州医学院附属医院感染病科	9	20	2.0	4.0