苏云金芽孢杆菌cry1Ac28基因的克隆及原核表达

• 作者: 曲步云 李明 李海涛 高继国
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 苏云金芽孢杆菌 cry1Ac28 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 61-67
• 分类号: Q785
• 字数: 4435字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2010.10.012

摘要

研究旨在克隆苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringieusis,Bt)Q-12的cry1Ac28基因并在原核载体中表达.应用PCR-RFLP法鉴定出Bt Q-12中含有cry1Ac基因,根据已知的cry1Ac全长基因序列设计特异引物,以Bt Q-12基因组DNA为模板扩增cry1Ac全长基因,与大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pEB相连接获得含有cry1Ac全长基因的重组质粒pEB-cry1Ac,经过序列分析表明,该基因编码区为3 537 bp,编码1 178个氨基酸,分子质量为133.3176 ku,pI为4.885,为弱酸性蛋白质,亮氨酸(Leu)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)三种氨基酸含量最高,分别为8.06%、7.80%、7.72%,该基因在大肠杆菌BL21(DE3)菌株能够正常表达133.3176 ku蛋白.该基因核苷酸序列已在GenBank中登录,登录号为FJ610439,并由Bt 8-内毒素基因国际命名委员会正式命名为cry1Ac28.为进一步研究cry1Ac28蛋白功能和活性打下了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明	东北农业大学生命科学学院	87	1222	18.0	32.0
2	李海涛	东北农业大学生命科学学院	53	381	9.0	18.0
3	高继国	东北农业大学生命科学学院	81	539	12.0	19.0
4	曲步云	东北农业大学生命科学学院	2	5	2.0	2.0