三重PCR检测草莓灰霉病菌、炭疽病菌和黄萎病菌

• 作者: 尹丹韩 王伟 王剑 王楠 高观朋
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 草莓 灰霉病菌 炭疽病菌 黄萎病菌 分子检测 三重PCR
• 年，卷（期）: 2010,（21）
• 页码范围: 4392-4400
• 分类号: S6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.21.008

摘要

[目的]探索和优化检测条件,建立同时检测草莓灰霉病菌Botrytis cinarea,炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides和黄萎病菌Verticillium dahliae的三重PCR检测体系,为3种病害的早期快速诊断和鉴定提供技术和方法.[方法]选择可以组合的3种病原菌特异引物,研究多重PCR的影响因素,优化PCR退火温度,采用正交试验方法,以3个引物组、Taq DNA聚合酶、dNTP和Mg2+六因素三水平优化多重PCR体系.[结果]建立并验证适合上述草莓主要病原菌的三重PCR最佳检测体系,可分别扩增出729、539和450 bp的特异条带,最适退火温度为50℃,25μL的反应体系中含有0.32 μmol·L-1 C729+/-,0.032 μmol·L-1 DB19/DB22、0.32 μmol·L-1 CgInt/ITS4,1.5 U Taq聚合酶、0.15 mmol·L-1 dNTP、1.6 mmol·L-1 MgCI2.[结论]利用上述引物组合和反应体系进行三重PCR检测,能够快速从田间发病植株和土壤中将草莓灰霉病菌、草莓炭疽病菌和草莓黄萎病菌检测出来,灵敏度可以达到10 Pg菌丝DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟	华东理工大学/生物反应器工程国家重点实验室	53	487	12.0	20.0
2	王剑	华东理工大学/生物反应器工程国家重点实验室	10	127	6.0	10.0
3	王楠	华东理工大学/生物反应器工程国家重点实验室	9	141	6.0	9.0
4	高观朋	华东理工大学/生物反应器工程国家重点实验室	7	125	6.0	7.0
5	尹丹韩	华东理工大学/生物反应器工程国家重点实验室	4	98	4.0	4.0