表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因重组腺病毒的遗传稳定性分析及滴度测定

• 作者: 徐彦召 王青 胡建和
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: H5N1亚型禽流感 重组腺病毒 遗传稳定性 病毒滴度
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 33-35
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 2870字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2010.09.018

摘要

研究表达H5N1亚型禽流感病毒HA基因重组腺病毒pAd.H5的遗传稳定性及重组病毒的滴度.将重组腺病毒pAd.H5在293细胞上连续传代20次,取第5、10、15和20代的重组病毒采用PCR方法扩增禽流感病毒HA基因,并进行基因序列分析;用标记为GFP的快速测定法计算出20代次时重组病毒的滴度.从各代重组病毒DNA中均扩增出了约1700bp的目的条带,与HA基因片段长度一致.基因序列分析表明:第5、10、15代重组病毒中的HA基因序列与原始转移载体序列完全一致,第20代重组病毒插入基因有1处发生了点突变(即HA基因417位A→G),但其编码的氨基酸未发生变化(即同义突变),表明表达的目的蛋白抗原表位未发生变化;计算出的重组病毒滴度为108.875pfu/0.1mL.重组腺病毒pAd-H5在293细胞上连续传代20次,具有良好的遗传稳定性,重组腺病毒的病毒滴度相对较高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡建和	河南科技学院动物科学学院	140	452	10.0	15.0
2	王青	河南科技学院动物科学学院	69	227	10.0	11.0
3	徐彦召	中国农业科学院上海兽医研究所	11	28	2.0	5.0