结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 戴晓天 王海晶 陈永锋
• 来源期刊: 四川医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 结核分支杆菌 rpoB基因 利福平 表达载体
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 基础与实验研究
• 页码范围: 564-566
• 分类号: Q78
• 字数: 2934字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0501.2010.05.005

摘要

目的 构建结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达栽体.方法 PCR技术扩增获得rpoB基因,连接入pBluescript Ⅱ SK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法 将rpoB基因定向连接到真核表达载体pQE-Trisystem中,构成pQE-Tri-rpoB,将pQE-Tri-rpoB转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,脂质体转染P815细胞后,以RT-PCR方法 检测mRNA表达.结果 构建了重组质粒pQE-Tri-rpoB,RT-PCR结果 证明rpoB可在P815细胞中转录.结论 成功构建了结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达栽体,rpoB基因可以在P815细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴晓天	第三军医大学西南医院呼吸科	59	330	8.0	16.0
2	陈永锋	第三军医大学西南医院呼吸科	14	55	4.0	7.0
3	王海晶	第三军医大学西南医院呼吸科	13	127	6.0	11.0