一步法RT-PCR和两步法RT-PCR对马铃薯病毒诊断研究的比较

• 作者: 宁红 张敏 陈阳婷
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 马铃薯病毒 核酸提取 一步法RT-PCR 两步法RT-PCR
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 所属期刊栏目: 植物保护科学
• 页码范围: 298-302
• 分类号: S41-30
• 字数: 3658字
• 语种: 中文

摘要

为建立快速、简便、灵敏度高、特异性强的RT-PCR检测马铃薯病毒技术,采用试剂盒和Total试剂2种方法,从马铃薯叶片和茎秆中提取马铃薯x病毒、马铃薯Y病毒、马铃薯S病毒、马铃薯A病毒以及马铃薯卷叶病毒的RNA.设计了5种马铃薯病毒引物,同时应用一步法RT-PCR和两步法RT-PCR的反应体系对5种病毒扩增,分别得到620 bp(PVX)、550 bp(PVY)、435 bp(PVS)、300 bp(PVA)和222 bp(PLRV)的扩增片段.将结果与报道的这5种马铃薯病毒核苷酸序列进行BLAST比对,表明扩增的5种马铃薯病毒靶带的序列与靶序列完全一致.2种诊断方法对马铃薯病毒核酸进行浓度检测,结果证明,两步法RT-PCR具有较高灵敏性.但这2种方法均可快速、简便、有效地诊断马铃薯病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张敏		139	1396	19.0	27.0
2	陈阳婷	成都市农林科学院园艺研究所	5	25	2.0	5.0