小鼠SK2基因亚克隆的构建和鉴定

• 作者: 安玉会 章茜 袁建党 赵国强
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠Ca2+激活钾通道 SK2基因 酵母 克隆 组织构建
• 年，卷（期）: 2010,（28）
• 页码范围: 5313-5316
• 分类号: R318
• 字数: 788字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.28.044

摘要

背景:小电导Ca2+激活钾(small conductance Ca2+-activated potassium channels,SK channels)通道存在于大多数可兴奋性细胞并存动作电位的复极化中发挥着重要作用.但SK通道与Ca2+及其他分子的偶合及调控途径尚未明确.目的:为观察SK2通道基因区段与Ca2+及其他分子的偶合及调控,构建pGBAT7和SK2基因片段重组子.方法:根据SK2基因的全长序列,设计3个SK2基因片段引物,经PCR扩增,测序鉴别后,分别亚克隆到酵母表达质粒pGBKT7.构建的pGBKT7-SK2亚克隆通过电转染法分别转染到酵母AH109菌中并被激活.pGBKT7-SK2亚克隆从酵母AH109菌中提取,电泳和测序鉴定.结果与结论:SK2目的基因PCR扩增产物分别为411,546,729 bp.成功构建了3个含有411,546,729 bp的pGBKT7-SK2亚克隆,电泳和测序鉴别表明构建的pGBKT7-SK2亚克隆完全符合设计要求.转染到酵母AH109菌中pGBKT7-SK2亚克隆可被激活,为探讨SK2通道与其他分子的功能相关提供了重要的物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学基础医学院免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
2	章茜	郑州大学基础医学院生理学教研室	55	186	8.0	10.0
3	安玉会	郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	51	260	8.0	13.0
4	袁建党	郑州大学基础医学院生理学教研室	2	6	1.0	2.0