应用基因扫描方法快速检测EGFR基因19外显子缺失突变

• 作者: 唐红艳 张绪超 林嘉颖 苏健 谢至 郭爱林 陈世良 陈剑光 陈志红 黄迎
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,非小细胞肺 EGFR 基因扫描 基因突变
• 年，卷（期）: 2010,（19）
• 页码范围: 3471-3473
• 分类号: R4
• 字数: 2195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2010.19.004

摘要

目的:应用基因扫描法检测人表皮生长因子受体(EGFR)基因19外显子缺失突变.方法:(1)将EGFR基因19外显子缺失(delE746-A750)型及野生型基因分别克隆到T载体.并将含突变型基因及含野生型基因的载体按1:1、1:5、1:10、1:50、1:100、1:300的比例进行混合,用基因扫描法检测19外显子的缺失,以确定其灵敏度.(2)基因扫描法检测225例非小细胞肺癌患者的手术组织或穿刺标本:荧光标记EGFR基因19外显子的上游引物,PCR扩增目的片段,3100A测序仪进行基因扫描.Gene Scan Genotyper3.5软件分析结果.同时用直接测序法检测EGFR 19外显子的缺失突变.结果:(1)基因扫描法可测出1:100混合液中的突变型,灵敏度较高.(2)225例肺癌标本,可检测出27例(12.0%)缺失:直接测序法则检出25例(11.5%)缺失突变.结论:基因扫描法检测EGFR基因19外显子的缺失,方法简便,成本低廉,敏感度高,可查出1%的突变.