高产纤维素酶绿色木霉基因工程菌的构建

• 作者: 于寒松 胡耀辉 闫舟
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 工学
• 关键词: 绿色木霉 CBH Ⅱ基因 瑞氏木霉启动子 外源基因表达系统
• 年，卷（期）: 2010,（25）
• 页码范围: 13617-13619,13625
• 分类号: TQ925
• 字数: 2913字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.25.025

摘要

[目的]构建CBH Ⅱ基因过量表达的绿色木霉工程菌. [方法]根据绿色木霉cDNA序列设计合成引物,PCR扩增CBH Ⅱ基因序列,将完整的目的基因与表达载体pCAMBIA1302连接,转入大肠杆菌DH5α中,获得重组质粒pCAMBIA1302-CBH Ⅰ.再将pCAMBIA1302-CBH Ⅰ重组质粒与瑞氏木霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶Ⅱ(CBH Ⅱ)Pcbh Ⅱ启动子片段连接,将潮霉素磷酸转移酶(hyg)基因片段插入Pcbh Ⅱ启动子下游,转入大肠杆菌DH5α中,获得重组表达质粒pCAMBIA1302- CBH Ⅱ.[结果]构建的重组表达质粒电转化后经SDS-PAGE电泳检测,绿色木霉纤维素酶CBH II基因在原宿主菌中成功过量表达,证实CBH Ⅱ基因在Pcbh Ⅱ启动子控制下进行高效表达.[结论]为高产纤维素酶系的工业化菌株构建奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡耀辉	吉林农业大学食品科学与工程学院	121	1061	16.0	26.0
2	闫舟	吉林农业大学食品科学与工程学院	1	5	1.0	1.0
3	于寒松	吉林农业大学食品科学与工程学院	89	334	9.0	14.0