岩栖蝮蛇毒纤溶酶基因克隆、序列分析及真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 于德涵 李贺 王广慧 赵文阁
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 岩栖蝮蛇 纤溶酶 基因克隆 序列分析 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2011,（14）
• 所属期刊栏目: 畜牧-研究报告
• 页码范围: 17-21
• 分类号: Q78
• 字数: 3682字
• 语种: 中文

摘要

克隆岩栖蝮蛇(Gloydius saxatilis)纤维溶解酶(Fibrinolytic enzyme,FLE)基因,分析基因序列并对该基因的功能进行分析;构建真核表达载体并鉴定.从岩栖蝮蛇毒腺细胞中提取总RNA,通过RT-PCR法扩增纤溶酶基因,与pMDl8-T载体连接进行TA克隆,再进行序列的测定并且对该序列进行分析.测序鉴定后将纤溶酶基因克隆入真核表达载体pEGFP-C1,构建该基因的真核表达载体pEGFP-FLE,进行双酶切、PCR和测序鉴定.扩增得到包括完整开放读码框在内的长为774 bp的纤溶酶基因序列,成功克隆了编码岩栖蝮蛇纤溶酶的基因序列,开放读码框编码257个氨基酸,其分子质量约为30kDa,成功构建了真核表达载体pEGFP-FLE.成功克隆岩栖蝮蛇毒纤溶酶基因并构建该酶的真核表达载体为该基因的真核表达及后续研究提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵文阁	哈尔滨师范大学生命科学与技术学院	117	809	15.0	20.0
2	王广慧	绥化学院生物与食品工程系	57	121	6.0	9.0
3	李贺	绥化学院生物与食品工程系	34	92	5.0	8.0
4	于德涵	绥化学院生物与食品工程系	27	48	5.0	6.0