mLumin转染人肝癌HepG2细胞系的建立

• 作者: 万洋洋 刘霞 成静 王荟 石慧娜 范兴文 许凤姣 邵启祥 邵青 闫美娜
• 来源期刊: 江苏大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: mLumin基因 HepG2 活体成像
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 322-325,封3
• 分类号: R392.9
• 字数: 2860字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2011.04.011

摘要

目的:建立mLumin+的HepG2细胞系,为进一步建立肿瘤模型和小动物荧光成像观察奠定基础.方法:采用磷酸钙法,将pcDNA3.0-mLumin质粒转染至人肝癌细胞系HepG2,经G418筛选扩增后通过PCR检测mLumin基因在转染的肝癌细胞HepG2中的表达情况,同时应用荧光显微镜及流式细胞仪检测mLumin+的HepG2细胞比例,最终将其接种于裸鼠的皮下,观察致瘤情况.结果:RT-PCR鉴定证实肝癌细胞HepG2中有mLumin基因的mRNA表达.在倒置荧光显微镜下,采用绿光(540 nm)激发时,可以见到大量的发射红色荧光的细胞,流式细胞术检测有50%的阳性率.小动物活体成像仪显示裸鼠皮下接种能够成瘤,组织冰冻切片也证实HepG2细胞中有大量mLumin蛋白表达.结论:成功建立了mLumin+的HepG2细胞,为进一步进行肿瘤的基础和应用研究奠定了基础.