重组人源细胞珠蛋白单抗制备及检测方法建立

• 作者: 李珍 李莹 汤金萍 王萍 董文其 魏威
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组人源细胞珠蛋白 单克隆抗体 ELISA双抗体夹心法 定量检测方法
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 375-378,400
• 分类号: R392
• 语种: 中文

摘要

目的 制备重组人源细胞珠蛋白(recombinant human Cytoglobin,rhCygb)单克隆抗体,并建立检测该蛋白双抗体夹心ELISA法,为下一步研究rhCygb药代动力学做准备.方法 用纯化的rhCygb免疫BALB/c小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法获得抗rhCygb的单克隆抗体杂交瘤细胞,间接ELISA法筛选制备单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法.结果 筛选获取了稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过抗原表位相加法实验获得5株表位不同的细胞株,Westem-blotting验证能与rhCygb特异性结合,间接ELISA法验证其不与本实验室制备的其它PET28a-BL21蛋白及BL21裂解液发生交叉反应.本方法 灵敏度为1.25ng/ml,在浓度为10～1250 ng/ml时,线性关系良好,相关性达0.9931,实验内和实验间平均变异系数分别为6.2%和10.92%.结论 成功建立了灵敏度好、特异性高的双抗体夹心法,为下一步研究rhCygb药代动力学奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董文其	南方医科大学生物技术学院生物制药系	43	142	6.0	9.0
2	王萍	南方医科大学生物技术学院生物制药系	25	53	5.0	6.0
3	魏威	南方医科大学生物技术学院生物制药系	19	70	6.0	7.0
4	李珍	南方医科大学生物技术学院生物制药系	24	82	6.0	8.0
5	李莹	南方医科大学生物技术学院生物制药系	7	24	2.0	4.0
6	汤金萍	南方医科大学生物技术学院生物制药系	2	5	1.0	2.0