重组人Versican G1蛋白在昆虫细胞中的表达

• 作者: 张一平 朱剑 黄烽
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白聚糖类 VG1 杆状病毒科 昆虫,细胞
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 380-382
• 页数: 3页
• 分类号: R593.2
• 字数: 2159字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2004.05.025

摘要

目的:利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统制备人蛋白聚糖Versican G1区(VG1)的重组蛋白.方法:将编码人VG1蛋白343个氨基酸的基因插入pFastBac1载体,转化大肠杆菌DH10Bac,提取重组Bacmids转染Sf9昆虫细胞,获取含重组人VG1蛋白的杆状病毒进一步感染昆虫细胞进行蛋白表达.通过Ni-NTA层析柱对重组蛋白进行纯化.免疫印迹方法对昆虫细胞培养上清中的蛋白成分进行鉴定,采用透明质酸结合实验确定重组人VG1蛋白的生物活性.结果:人VG1基因在昆虫细胞中获得高水平表达,重组人VG1蛋白具免疫原性和与透明质酸结合的生物活性.结论:昆虫细胞表达的重组人VG1蛋白具有良好的免疫原性和生物活性.