HPV18E6原核表达载体的构建及3×flag-HPV18E6融合蛋白的诱导表达

• 作者: 凌斌 周颖 朱靖 王青元
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒18 原核细胞 遗传载体 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 112-115
• 分类号: R373.9|R394.2|R342.33
• 字数: 3237字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2011.02.003

摘要

目的 构建pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白.方法 用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出带HindⅢ、SalⅠ酶切位点的HPV18E6基因片段,将HPV18E6基因片段克隆到p3×flag-myc-CMV-24载体上.然后设计特异性引物扩增3×flag-HPV18E6重组基因片段,将该片段连接到pET-22b原核表达载体上,在大肠杆菌中诱导表达3×flag-HPV18E6融合蛋白,经Western blot鉴定.结果 pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体构建正确,IPTG诱导以浓度0.1 mmol/L,时间2 h为宜,表达的3×flag-HPV18E6融合蛋白相对分子质量约20 ku.结论 成功构建pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体并诱导3×flag-HPV18E6融合蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	凌斌	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室安徽省分子医学重点实验室	83	347	8.0	13.0
2	朱靖	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室安徽省分子医学重点实验室	13	54	4.0	7.0
3	周颖	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室安徽省分子医学重点实验室	87	381	11.0	15.0
4	王青元	安徽医科大学附属省立医院妇产科分子实验室安徽省分子医学重点实验室	12	44	4.0	6.0