禽流感病毒H5N1血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达

• 作者: 于在江 张烨 舒跃龙 辛丽 邹淑梅 陈永坤 陈清轩 陈禹
• 来源期刊: 实验动物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 禽流感病毒H5N1 血凝素 神经氨酸酶 真核酵母表达
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究·论著
• 页码范围: 1-5
• 分类号: Q939.47
• 字数: 3925字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6179.2011.03.001

摘要

目的 克隆、表达和鉴定禽流感病毒H5N1血凝素基因(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶基因(neuramidinase,NA)序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础.方法在成功克隆禽流感病毒H5N1全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pMET A上,构建了重组表达质粒pMET A/HA(49～1 587 bp)、pMET A/NA(121～1 200bp),电转化真核酵母菌pMAD16,甲醇诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性.结果重组蛋白在酵母菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示蛋白表达后形成了二聚体,蛋白纯度占总蛋白的95％以上,EUSA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性.结论本研究成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 HA、NA基因序列,为禽流感病毒H5N1诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张烨	中国疾病控制中心病毒病预防控制所	23	109	7.0	9.0
2	邹淑梅	中国疾病控制中心病毒病预防控制所	6	2	1.0	1.0
3	于在江	中国疾病控制中心病毒病预防控制所	12	13	2.0	3.0
4	辛丽	中国疾病控制中心病毒病预防控制所	12	25	3.0	4.0
5	陈永坤	中国疾病控制中心病毒病预防控制所	9	13	2.0	3.0
6	陈禹		1	2	1.0	1.0
7	陈清轩		5	12	2.0	3.0