SV40LT基因重组腺病毒载体的包装、鉴定及用于转染日本血吸虫童虫细胞的研究

• 作者: 余平 刘碧源 周军 张顺科 曾庆仁 杨胜辉 蔡力汀
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: SV40LT基因 腺病毒载体 日本血吸虫 童虫细胞
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1016-1020
• 分类号: R383.2
• 字数: 4716字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.11.016

摘要

目的 构建携带SV40LT基因的重组腺病毒表达载体,制备具有感染力的重组腺病毒,观察其转染日本血吸虫(Schistosoma ja ponicum,Sj)童虫细胞后的表达情况.方法 采用体外连接法构建好的携带SV40LT基因的重组腺病毒质粒(AdHu5-SV40LT)转化Stbl2感受态菌,获得重组腺病毒质粒后,经Pac Ⅰ酶切线性化后转染293A细胞,获得出重组腺病毒(AdHu5-SV40LT).将重组腺病毒感染Sj童虫细胞,采用RT-PCR和免疫组织化学检测SV40LT基因的表达情况.结果 重组腺病毒载体质粒可转染293A细胞并可在293A细胞内进行有效的复制；提取病毒DNA进行PCR检测证实含有SV40LT目的基因.以重组腺病毒能感染Sj童虫细胞,经RT-PCR和免疫组化检测有SV40LT基因在细胞中的表达.结论 成功包装了具有感染能力的含SV40LT基因的重组腺病毒,感染Sj童虫细胞后目的基因有表达,为进一步探索日本血吸虫细胞永生化提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾庆仁	中南大学湘雅医学院细胞与分子生物学实验中心	58	252	9.0	12.0
2	刘碧源	中南大学湘雅医学院细胞与分子生物学实验中心	15	146	5.0	12.0
4	周军	中南大学湘雅三医院实验中心	66	437	10.0	16.0
5	蔡力汀	中南大学湘雅医学院细胞与分子生物学实验中心	25	95	6.0	8.0
6	余平	中南大学湘雅医学院细胞与分子生物学实验中心	102	374	10.0	14.0
7	杨胜辉	湖南中医药大学病原生物学与免疫学教研室	40	79	5.0	6.0