重组肉毒神经毒素A轻链(BONT/A LC)突变体的构建、表达与活性分析

• 作者: 宋孚洋 康琳 王景林 王玉炯 马臣杰 高姗
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 肉毒神经毒素 轻链 突变
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 263-267
• 页数: 5页
• 分类号: R996.1
• 字数: 4256字
• 语种: 中文

摘要

A型肉毒神经毒素的轻链(BoNT/A LC)是一种锌依赖性的金属内肽酶.通过X射线分析其结构并结合一些文献报道表明,轻链上的Arg362和Tyr365直接参与了酶的催化作用,而Glu350则处于其活性位点的中心位置.采用定点突变技术,对编码这3个关键性的氨基酸位点的碱基进行突变(Arg362Ala、Tyr365Phe、Glu350Ala),获得了BoNT/A LC突变体.突变体蛋白与BoNT/A的底物蛋白SNAP-25进行切割反应,结果表明,未经突变的BoNT/A轻链蛋白能够特异性地识别SNAP-25蛋白上的Q197-R198位点,而突变体蛋白则完全无法识别该位点,不具有金属内肽酶活性,成功地去除了肉毒神经毒素的毒力,为下一步的全长肉毒神经毒素重组疫苗的研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王景林	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室	44	147	6.0	9.0
2	王玉炯	宁夏大学生命科学学院	108	671	13.0	20.0
3	康琳	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室	21	51	4.0	5.0
4	高姗	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物与生物安全国家重点实验室	11	31	3.0	4.0
5	宋孚洋	宁夏大学生命科学学院	6	7	2.0	2.0
6	马臣杰	宁夏大学生命科学学院	7	10	2.0	3.0