Lescpth5诱饵载体的构建及其自激活作用的检测

• 作者: 万一 张月娟 张琨 赵廷昌 陈华民
• 来源期刊: 植物病虫害研究：英文版
• 学科: 生物学
• 关键词: 番茄细菌性斑点病菌 诱饵载体 酵母双杂交 自激活
• 年，卷（期）: pdapzwbchyj_2011,（4）
• 页码范围: 1-2
• 页数: 2页
• 分类号: Q51

摘要

[目的]构建诱饵载体pGBKT7-Lescpth5,并检测其转录自激活活性及对酵母细胞的毒性。[方法]采用PCR技术扩增Lescpth5基因,连接到诱饵载体pGBKT7上,转化重组载体于酵母感受态细胞AH109中,在营养缺陷型培养基上进行自激活检测和毒性检测。[结果]酶切和测序鉴定结果显示诱饵载体pGBKT7-Lescpth5构建成功,读码框正确。自激活检测结果和毒性检测结果显示诱饵载体对酵母菌株AH109没有转录激活活性,对酵母菌也无毒害作用。[结论]成功构建的诱饵载体可以用于酵母双杂交系统中,为下一步的cDNA文库筛选奠定基础。