VSV糖蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测

• 作者: 宋德光 韩岩岩
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 水泡性口炎病毒 糖蛋白 酵母双杂交 诱饵载体
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 109-114
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

构建水泡性口炎病毒糖蛋白（VSV-G）酵母双杂交诱饵载体，检测其在酵母细胞中的表达和自激活作用，为进一步研究酵母双杂交系统筛选与VSV-G相互作用蛋白奠定基础。通过RT-PCR方法从水泡性口炎病毒（VSV）克隆糖蛋白（G）基因， BamH I和Sal I双酶切后连接诱饵载体pSos，获得诱饵质粒pSos-VSV-G，经测序鉴定后pSos-VSV-G转化到酵母菌株cdcH25（α），在营养缺陷培养基中观察pSos-VSV-G的自激活作用和毒性作用，同时利用蛋白印迹法分析诱饵蛋白的表达。成功扩增VSV-G基因，并准确克隆入pSos中，诱饵载体pSos-VSV-G成功转化到酵母菌株cdcH25（α）中，经表型筛选检测无自激活作用和毒性作用，蛋白印迹法检测证实pSos-VSV-G在酵母细胞中表达诱饵蛋白。可以利用酵母双杂交系统筛选与VSV-G相互作的蛋白质。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋德光	吉林大学畜牧兽医学院	41	118	6.0	9.0
2	韩岩岩	遵义医学院公共卫生学院	10	9	2.0	2.0