双层面调控Saccharomyces cerevisiae碳流促进L-乳酸积累

• 作者: 刘立明 周景文 堵国成 汪军 赵亮亮 陈坚
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: S.cerevisiae L-乳酸 碳代谢流 NADH
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 50-58
• 分类号: Q935
• 语种: 中文

摘要

[目的]调控Sacchromyces cerevisiae丙酮酸节点碳流分布促进L-乳酸积累.[方法]利用同源重组方法,将来源于Bovine的乳酸脱氢酶基因LDH整合到S.cerevisiae CEN.PK2-1C基因组中,同时敲除丙酮酸脱羧酶基因PDC1,将碳流导向L-乳酸的积累,构建了基因工程菌S.cerevisiae CEN.PK2-1C[LDH].在此基础上,通过分析丙酮酸节点处关键酶对NADH的Km值不同,而将来源于Streptococcus pneumoniae的NADH氧化酶(nox)过量表达于CEN.PK2-1C[LDH]中,构建基因工程菌S.cerevisiae CEN.PK2-1C[LDH]-nox.[结果]与出发菌株S.cerevisiae CEN.PK2-1C比较,S.cerevisiae CEN.PK2-1C[LDH]发酵液中L-乳酸积累量从0 g/L增加到15 g/L,而乙醇浓度则从27.3 g/L降为16.2 g/L;过量表达了nox的S.cerevisiae CEN.PK2-1C[LDH]-nox的发酵液中L-乳酸浓度则进一步从15 g/L增加到20 g/L,乙醇浓度从16.2 g/L降为8.2 g/L.[结论]本研究通过构建S.cerevisiae L-乳酸合成途径和降低NADH/NAD+比率,在引入外源途径和调控辅因子浓度两个层面上成功实现了S.cerevisiae丙酮酸代谢节点碳流的重新分布,促进了 L-乳酸的积累.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	堵国成	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	339	3648	30.0	42.0
2	刘立明	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	70	547	15.0	19.0
6	周景文	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	50	161	7.0	10.0
7	汪军	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	3	19	3.0	3.0
8	赵亮亮	江南大学食品科学与技术国家重点实验室	1	6	1.0	1.0