感染CDV的犬病料N、H、F基因的克隆与序列分析

• 作者: 乔明明 刘巧荣 包新奇 孙明 李佳 王芳 秦亚嫚 陈曦 陈西钊
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 犬瘟热 血凝索蛋白基因 融合蛋白基因 核衣壳蛋白基因 序列分析S
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 37-41
• 分类号: R33
• 字数: 4075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671.7856.2011.04.009

摘要

目的 了解病料中犬瘟热病毒(CDV)的变异情况,为犬瘟热的预防与治疗提供理论依据.方法 采用RT-PCR方法对犬病料中CDV的血凝素蛋白(H)、融合蛋白(F)和核农壳蛋白(N)基因进行扩增,将扩增产物克隆到pGEM-T-easy载体中测序,并进行序列分析.结果 测定一株CDV的H、F和N基因大小分别为1863 bp、1653 bp和2235 bp.同源性分析表明,未发现碱基的插入和缺失.该病毒的H、F和N基因分别与国内强毒株BJ080127株的H基因、GN株的F基因和HL株的N基因亲缘关系最近,氨基酸同源性分别为97.3%、97.7%和99.3%.与国外标准野毒株A75-17在核苷酸水平上同源性依次为94.4%、93.8%和97.2%,与疫苗株CDV3在核苷酸水平上同源性分别为88.5%、88.8%和93.9%.系统进化树表明该病毒与国内强毒株在同一谱系.糖基化分析显示,该病毒在F基因3～5位氨基酸处多出1个糖基化位点.结论 本研究从犬病料中成功克隆了犬瘟热病毒血凝素蛋白、融合蛋白和核衣壳蛋白,在F基因中新增了一个糖基化位点,为犬瘟热的遗传变异和流行学研究提供了分子生物学依据.