兔抗鼠CaV1.2羧基末端多克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 刘大力 粱景平 许多 赵守亮
• 来源期刊: 牙体牙髓牙周病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钙离子通道 抗体制备 酶联免疫吸附法 蛋白斑点杂交
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 229-232,213
• 页数: 5页
• 分类号: R780.2
• 语种: 中文

摘要

目的:制备高效价的兔抗鼠钙通道CaV1.2羧基末端多克隆抗血清.方法:人工合成鼠L型钙离子通道CaV1.2羧基末端短肽;用该短肽与马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(Keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联免疫兔获得抗血清;利用饱和硫酸铵盐析和亲和层析法获得纯化后抗血清;酶联免疫吸附法实验测定抗体效价;斑点杂交实验测定抗血清特异性.结果:经免疫得到兔抗鼠L型钙离子通道CaV1.2羧基末端多克隆抗血清;ELISA和斑点杂交实验证实兔抗鼠CaV1.2羧基末端多克隆抗体可以特异性识别CaV1.2羧基末端多肽.结论:本实验成功制备纯化抗CaV1.2羧基末端多克隆抗体并且可以用于后续CaV1.2羧基末端水解片段的功能研究.