3种方法 提取的B群脑膜炎奈瑟菌外膜囊泡组分的免疫原性、毒性及杀菌活性

• 作者: 姬秋彦 徐维明 戴宗祥 李健峰 李晓晶 李智华 毕研伟 闫玲梅 高丹丹
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 奈瑟球菌,脑膜炎,血清B群 外膜囊泡 疫苗
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 预防制品
• 页码范围: 1183-1186
• 分类号: R378.1+5|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 采用3种方法 提取B群脑膜炎奈瑟菌(Serogroup B Neisseria meningitidis,MenB)的外膜囊泡(Outer membrane vesicle,OMV),并分析其免疫原性、毒性和杀菌活性.方法 分别采用去污剂+EDTA、EDTA、从培养上清液中离心提取3种方法 获得MenB的OMV,即dOMV、nOMV和sOMV,SDS-PAGE分析OMV主要蛋白组分,Lowry法测定蛋白浓度,LAL试验测定内毒素含量.将3种OMV免疫小鼠,采用ELISA法测定小鼠血清中IgG抗体滴度,杀菌力试验测定3种OMV诱导针对MenB补体依赖的杀菌反应.结果 dOMV、nOMV和sOMV的主要蛋白成分基本一致,内毒素含量分别为5.0× 103、7.5× 104和4.0× 106EU/mg,产率分别为11.640、10.210和4.135 μg/10m个细菌；dOMV、nOMV和sOMV组小鼠血清抗体滴度分为3.98×106、2.51×107和5.62× 104,与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05),杀菌抗体滴度分别为501.70、697.11和55.39.结论 用3种不同的方法 成功制备了3种MenB的OMV,并对其免疫原性、毒性和杀菌活性进行了比较,为研发B群脑膜炎OMV疫苗提供了理论依据.