pVAX1-Ag85B的构建及其免疫原性的初步探索

• 作者: 唐硕 张宗平 李云祥 杨晓峰 汪海龙 王安果
• 来源期刊: 现代泌尿外科杂志
• 关键词: DNA疫苗 pVAX1 Ag85B 膀胱肿瘤
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 129-132
• 分类号: R730.54|R737.14
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-8291.2012.02.007

摘要

目的 构建以Ag85B基因为基础的DNA疫苗,并对其在小鼠体内的免疫原性进行初步分析.方法 以pET28a-Ag85B基因组DNA为模板,PCR扩增获得Ag85B全长基因;将PCR产物构建成pUCm-Ag85B亚克隆;经限制性内切酶消化后克隆入pVAX1载体中构建真核表达质粒pVAX1-Ag85B,酶切、DNA测序鉴定.并将构建的DNA疫苗经肌肉免疫荷瘤小鼠,检测血清特异性抗体水平和脾淋巴细胞的增殖活性,并与BCG组、空白质粒组、生理盐水组相比较.结果 经NheⅠ和HindⅢ双酶切、DNA测序鉴定后证实,Ag85B基因定向克隆入pVAX1载体,碱基无突变,序列完全正确.免疫荷瘤小鼠后,pVAX1-Ag85B组和BCG组均可提高淋巴细胞增殖活性,但效果不及卡介苗;pVAX1-Ag85B组的抗体滴度为 1∶400,BCG免疫组的抗体滴度为1∶800.结论 成功地构建了pVAX1-Ag85B质粒,为膀胱肿瘤的基因免疫治疗提供可靠的实验依据.免疫小鼠后,可提高小鼠免疫水平,但效果不及卡介苗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨晓峰	山西医科大学第一医院泌尿外科	89	226	7.0	9.0
2	张宗平	南充市中心医院泌尿外科	30	92	6.0	9.0
3	王安果	南充市中心医院泌尿外科	29	77	5.0	8.0
4	唐硕	南充市中心医院泌尿外科	12	62	5.0	7.0
5	李云祥	南充市中心医院泌尿外科	20	83	5.0	8.0
6	汪海龙	南充市中心医院泌尿外科	5	15	1.0	3.0