猪细小病毒单克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 刘奇 周智 张倩 曹振 李晓霞 田克恭 翟新验 胡冬梅 董昕欣 遇秀玲 邓小雨 顾小雪
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 单克隆抗体 免疫过氧化物酶单层试验 间接免疫荧光
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 54-57,封4
• 分类号: S852.65|R332
• 字数: 3926字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671.7856.2011.09.013

摘要

目的 制备猪细小病毒(PPV)杂交瘤细胞株,并对其分泌的PPV单克隆抗体进行鉴定.方法 按常规方法制备并获得2株杂交瘤细胞.用染色体分析对杂交瘤细胞进行鉴定,用间接ELISA、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)对其分泌的单克隆抗体进行效价测定、亚型鉴定和特异性鉴定.结果 得到2株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株2H9、1F9,染色体数目介于90～110之间.细胞上清效价均达1:1 ×10(4),腹水效价均达1:1×10(7),其亚型分别为IgG1,IgM,均为kappa链.2H9、1F9单抗与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒I型(PCV-1)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、乙脑病毒(JEV)等均无交叉反应.IPMA和IFA检测结果 显示2H9、1F9单抗均能与接种于PK-15细胞的PPV发生特异性反应.结论 成功制备了2株抗PPV杂交瘤细胞株,证实其产生的单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性.