赤拟谷盗HSP70基因克隆和竞争定量PCR检测

• 作者: 尹新明 苏丽娟 董晓慧
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 赤拟谷盗 热激蛋白70 竞争定量PCR 内部竞争物 同源性分析
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 218-223
• 分类号: Q966
• 语种: 中文

摘要

为研究赤拟谷盗Tribolium castaneum受到热胁迫后高度保守的热激蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因的表达变化,本研究扩增了681 bp的赤拟谷盗hsp70片段,编码227个氨基酸残基,GenBank登录号为HM345948.同源性分析表明:赤拟谷盗hsp70核苷酸序列与马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata的hsp70(GenBank登录号:AF322911.1)同源性最高,为97%;其推测的蛋白序列与马铃薯甲虫、甘蓝夜蛾Mamestra brassicae、黑腹果蝇Drosophila melanogaster和美洲斑潜蝇Liriomyza,sativae的HSP70蛋白均有94%以上的同源性.利用RT-PCR技术得到与赤拟谷盗hsp70进行竞争定量的内部竞争物,以等量的目标cDNA和一系列稀释的竞争模板进行竞争PCR扩增,构建了hsp70的竞争定量PCR检测体系,该体系标准曲线的线性方程为Y=1.032X-1.618(r2=0.975).这些结果为赤拟谷盗的hsp70定量检测提供了方便,并为热控技术防治害虫提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏丽娟	河南农业大学生命科学学院	44	160	7.0	10.0
2	尹新明	河南农业大学植物保护学院	68	577	13.0	21.0
3	董晓慧	河南农业大学植物保护学院	1	4	1.0	1.0