植酸酶根特异表达载体的构建及大豆转化

• 作者: 乔亚科 乔坤艳 乔潇 崔姗姗 李明刚 李桂兰
• 来源期刊: 核农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 外展蛋白信号肽 pyk10启动子 phyA基因 大豆 转基因 植酸酶 根特异表达
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 892-897
• 分类号: Q78
• 字数: 4098字
• 语种: 中文

摘要

应用PCR方法分别从胡萝卜基因组中扩增出96bp的外展蛋白信号肽编码序列片段,从拟南芥基因组中扩增出1454bp的pyk10启动子片段,用RT-PCR方法从无花果曲霉（Aspergillus ficuum3.4322）中扩增出phyA基因,长1347bp。然后,分别克隆到pMD18-T载体。应用已设计的限制酶切位点,通过5个中间载体将3段DNA片段连接构成2.9kb的表达单元Ppyk10-S-phJA（KSA）,将KSA片段插入初始载体pC-GENERAL,构建成植酸酶根特异表达载体pPC-KSA。利用农杆菌介导法将无花果曲霉植酸酶基因phyA转入到栽培大豆品种吉林35中,在大豆转基因植株中正确表达,产生有活性的植酸酶,且能分泌到根外。T3代植株根系分泌植酸酶活性比未转化植株提高了2～4倍。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明刚	南开大学生命科学学院	19	224	7.0	14.0
2	乔潇	上海大学材料科学与工程学院	2	17	2.0	2.0
3	乔坤艳	南开大学生命科学学院	1	7	1.0	1.0