黑斑原鮡AFLP分析体系的建立

• 作者: 吴常文 祁鹏志 谢从新 郭宝英
• 来源期刊: 水生态学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: AFLP 黑斑原鮡 反应体系
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 技术报告
• 页码范围: 127-131
• 分类号: Q503
• 字数: 3777字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-1278.2011.03.023

摘要

建立黑斑原鮡（Glyptosternum maculatum）AFLP反应体系,对DNA提取、双酶切、连接、预扩增、选择性扩增和银染效果进行了探索。结果表明,40μLTaqI酶切体系中65℃先酶切2h,EcoRI酶切和连接同时进行,EcoRI酶和T4DNA连接酶的用量均以2U为宜,温度与时间分别为37℃和3h,连接产物稀释10倍作为预扩增的模板。利用这种优化的反应体系,5对选择性扩增引物组合表现出较高的稳定性、清晰度和多态性,它们分别是：E-AAC/T-AAT、E-AAC/T-AAG、E-AAG/T-ACA、E-AAG/T-AAT和E-AAT/T-AGA。5对引物组合对96个样本扩增,共得到332条清晰可辨、可重复的条带,平均每对引物组合扩增出66.4条带,其中51条带是多态的。将AFLP技术用于黑斑原鮡的研究,通过优化体系的建立,为其种质资源的研究奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢从新	华中农业大学水产学院	134	1698	23.0	33.0
2	吴常文	浙江海洋学院海洋科学学院浙江省海洋养殖装备与工程技术重点实验室	149	1482	20.0	27.0
3	祁鹏志		2	0	0.0	0.0