西尼罗病毒NS1蛋白特异性单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 刘霓红 吴东来 孙恩成 徐青元 李文京 杨涛 杨银辉 林燕 步志高 马健男
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 西尼罗病毒 NS1蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 529-532
• 分类号: R392.12
• 字数: 4005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.06.012

摘要

目的:制备针对西尼罗病毒NS1蛋白的特异性单克隆抗体.方法:以原核表达的重组NS1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠并通过常规杂交瘤技术将免疫后小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行融合.以真核表达的重组NS1蛋白为检测用抗原,建立间接ELISA检测方法筛选分泌NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞.并利用Western blot和IFA试验对所获得的单克隆抗体进行鉴定.结果:共获得了2株稳定分泌NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为WN-1C10和WN-3D10,其亚类鉴定分别属于IgG2a和IgG1.这2株单克隆抗体均能与西尼罗病毒NS1蛋白和病毒抗原发生特异性反应,而与日本脑炎病毒无交叉反应.结论:本实验成功制备出针对西尼罗病毒NS1蛋白的特异性单克隆抗体,为我国建立西尼罗病毒与日本脑炎病毒的血清学鉴别诊断方法奠定了基础.