幽门螺杆菌VacA N端片段通过线粒体途径诱导GES-1细胞凋亡

• 作者: 于文 余敏君 张艳 曹斌 杨卓 黎村艳
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 VacA GES-1细胞 线粒体途径 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 251-255,260
• 分类号: R392.32
• 字数: 5283字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.03.014

摘要

目的:本研究初步探讨幽门螺杆菌(H.pylori)空泡毒素单一毒力决定簇对GES-1胃黏膜上皮细胞凋亡的影响,为进一步研究H.pylori的致病机制奠定基础.方法:将本课题组已构建的pDsRed-Monomer-C1/VacA N端真核表达载体转染至GES-1细胞中,Western blot鉴定VacA蛋白在细胞中的表达;电子显微镜和中性红摄取试验检测GES-1细胞的空泡样变;Hoechst 33342染色、Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒以及电镜观察细胞凋亡情况,同时采用分光光度法检测细胞Caspase-9、Caspase-3的活化程度,Rho123检测细胞跨膜电位的变化,ELISA法检测细胞色素C的释放.结果:重组质粒pDsRed-Monomer-C1/VacA转染GES-1细胞24小时后,电镜下可明显观察到空泡样变及核固缩、染色质边聚等凋亡特征,重组质粒组部分细胞发生空泡样变;Hoechst 33342染色后镜下可见明显的核染色质浓缩,Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒检测发现重组质粒组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);Caspase-9和Caspase-3活化程度呈时间依赖性增加,分别在12小时和24小时达到峰值;Rho123染色发现线粒体跨膜电位明显降低;重组质粒转染组释放细胞色素C的浓度呈时间依赖性正相关,与空质粒组及对照组相比差异显著(P<0.05).结论:VacA N端片段可诱导GES-1细胞凋亡及空泡样变,VacA蛋白可激活Caspase-9和Caspase-3,且可能主要通过线粒体途径诱导GES-1细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余敏君	南华大学医学院病原生物学研究所	104	491	11.0	17.0
2	张艳	南华大学医学院病原生物学研究所	56	239	10.0	13.0
3	于文	南华大学医学院病原生物学研究所	9	20	2.0	4.0
4	黎村艳	南华大学医学院病原生物学研究所	4	19	2.0	4.0
5	曹斌	南华大学医学院病原生物学研究所	3	14	2.0	3.0
6	杨卓	南华大学医学院病原生物学研究所	2	12	1.0	2.0