桑树天冬酰胺合成酶基因的克隆与表达分析

• 作者: 刘利 张林 方荣俊 潘刚 潘宝华 程嘉翎 赵卫国
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 桑树 天冬酰胺合成酶 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 1-8
• 分类号: S888.2|Q78
• 字数: 5133字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2011.01.001

摘要

天冬酰胺合成酶B(asparagine synthetase,AS-B;EC 6.3.5.4)参与植物氮同化过程的催化与调节.在构建的盐胁迫下桑树(Morus L.)抑制消减杂交(SSH)文库中发现一个编码天冬酰胺合成酶的基因片段,采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法获得2 061 bp的全长序列,完整的开放读码框(ORF)长1 761 bp,编码586个氨基酸,预测蛋白分子质量65.66 kD,将该基因命名为桑树天冬酰胺合成酶基因(MaAS,GenBank登录号:HQ025955).序列分析显示,MaAS编码的蛋白包括2个保守的功能域(谷氨酰胺-氨基转移结构域和合成酶结构域),与其它植物天冬酰胺合成酶的氨基酸序列相似性在75%以上.将MaAS基因开放读码框连接到pET28a(+)表达载体中,转化大肠杆菌BL21后,诱导表达的MaAS重组蛋白分子质量大小与预测的分子质量一致.采用邻接法构建的桑树和其它植物基于MaAS蛋白氨基酸序列的系统进化树显示:桑树、葡萄(Vitis vinifera)、毛果杨(Populus trichocarpa)、蓖麻(Ricinus communis)聚为一类,亲缘关系较近.半定量RT-PCR分析表明,MaAS基因在桑树不同部位的转录水平存在明显差异,在盛花期的雌花中转录水平最高,尚未木质化的幼根和成熟桑椹中的转录水平较高,幼茎的茎皮和木质部中的转录水平较低,嫩叶中的转录水平很低,腋芽中的转录水平最低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张林	中国农业科学院蚕业研究所	39	542	13.0	23.0
2	赵卫国	中国农业科学院蚕业研究所	40	701	16.0	25.0
3	程嘉翎	中国农业科学院蚕业研究所	48	342	12.0	15.0
4	方荣俊	中国农业科学院蚕业研究所	10	124	6.0	10.0
5	刘利	中国农业科学院蚕业研究所	37	562	14.0	23.0
6	潘刚	中国农业科学院蚕业研究所	5	25	3.0	5.0
7	潘宝华	江苏科技大学生物与环境工程学院	1	8	1.0	1.0