日本血吸虫TGF-β受体I基因胞外段的克隆与表达

• 作者: 李孜 陈姗 马长玲 高志岩 黄俊 黎小妍
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 SjTβRI 克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 4-7
• 分类号: R383.24
• 语种: 中文

摘要

目的 获得日本血吸虫TGF-β受体I胞外段(SjTβ3RIout)的序列,行原核克隆和表达,并分析其蛋白的免疫学功能.方法 应用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)方法获得SjTβRI基因cDNA部分序列,用RT-PCR方法扩增SjTβRI胞外段(SjTβRlout)基因,构建pET28a(+)重组原核表达载体,并测序鉴定.将质粒转入大肠埃希菌,IPTG诱导表达,并使用Ni离子亲和层析并透析处理获得纯化重组蛋白.使用纯化蛋白与弗氏佐剂共同免疫SD大鼠获得抗血清,使用ELISA方法检测血清中SjTBRIout特异抗体IgG含量.结果 成功构建SjTβRIout原核表达载体.测序鉴定显示SjTβ3RIout包含399 bp,编码133个氨基酸,并且与曼氏血吸虫TGF-β受体I的同源性较高.重组蛋白经SDS-PAGE分析,显示其相对分子质量约为20 000,与目的 基因编码蛋白的预测分子量相符.经重组蛋白免疫的SD大鼠产生高效价(>1:100 000000)的抗原特异性IgG抗体.结论 首次获得pET28a(+)-SjTβRIout的重组蛋白,并且证明其具有良好的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李孜	广州医学院病原生物学与免疫学教研室	24	71	4.0	6.0
2	马长玲	广州医学院病原生物学与免疫学教研室	21	94	5.0	9.0
3	黄俊	广州医学院病原生物学与免疫学教研室	16	93	6.0	9.0
4	陈姗	广州医学院病原生物学与免疫学教研室	3	3	1.0	1.0
5	高志岩	广州医学院病原生物学与免疫学教研室	4	24	2.0	4.0
6	黎小妍	广州医学院病原生物学与免疫学教研室	1	0	0.0	0.0