重组戊型肝炎病毒抗原ELISA检测方法的建立

• 作者: 吴业红 常军亮 张健锋 时成波 李春晖 贾媛 郭立君 陈子杨
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,戊型 抗原 病毒样颗粒 IgY 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 1363-1365,1372
• 分类号: R373.2
• 语种: 中文

摘要

目的 建立重组戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于HE疫苗中HEV抗原含量的检测.方法 以重组HEV病毒样颗粒作为免疫原,免疫母鸡,制备抗HEV-IgY多克隆抗体,纯化后作为包被抗体,HRP标记的抗HEV单克隆抗体作为检测抗体,建立HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行验证.用建立的方法检测3批HE疫苗成品的HEV抗原含量,计算HEV抗原对氢氧化铝的吸附率.结果 建立的ELISA方法线性范围为2～128 ng/ml,最低定量限为2 ng/ml;该方法检测冻干甲肝减毒活疫苗、重组人白介素-2( IL-2)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、人血白蛋白、小牛血清及健康人血清均无交叉反应；该方法检测3个浓度的HEV抗原内部参考品的回收率在95. 13％～104.50％之间,试验内及试验间变异系数均＜15％；包被抗HEV-IgY的酶标板于37℃放置5d,其检测HEV抗原内部参考品的A 450值及敏感性均未发生显著变化；3批HE疫苗成品中HEV抗原对氢氧化铝的吸附率均大于95％,符合相关质控要求.结论 已成功建立了HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,可用于HEV抗原含量的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	时成波		13	34	3.0	5.0
2	郭立君		27	91	4.0	8.0
3	李春晖	吉林大学第二临床医院医务科	7	23	3.0	4.0
4	吴业红		5	6	2.0	2.0
5	陈子杨		10	26	3.0	4.0
6	贾媛		4	13	2.0	3.0
7	常军亮		5	13	2.0	3.0
8	张健锋		3	4	1.0	2.0