大鼠抗小鼠重组膜联蛋白A2单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 包红雨 张丽意 江淼 沈飞 谢丽倩 赵益明 阮长耿
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 单克隆抗体 杂交瘤细胞系 膜联蛋白A2
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 879-882,892
• 分类号: R392- 22
• 语种: 中文

摘要

目的 建立能够分泌特异性抗小鼠膜联蛋白A2( AnxA2)的大鼠—小鼠融合单克隆抗体杂交瘤细胞系.方法 利用重组小鼠AnxA2蛋白作为抗原免疫Wistar大鼠,通过细胞融合和杂交瘤筛选技术建立特异分泌抗小鼠AnxA2蛋白的大鼠—小鼠融合单抗杂交瘤细胞株.采用酶联免疫吸附方法确定单克隆抗体亚型,免疫印迹和流式细胞术验证所筛选的单克隆抗体的特异性.结果 通过对30多个分泌抗体的融合细胞克隆的筛选,获得一株分泌特异性抗小鼠AnxA2的大鼠—小鼠融合单克隆抗体杂交瘤细胞系SZ-158,连续培养传代后染色体分析证实,Wistar大鼠脾细胞与小鼠SP2/0细胞稳定融合；免疫印迹和流式细胞术显示该单克隆抗体可以特异识别小鼠AnxA2重组蛋白.结论 该研究所获得的大鼠—小鼠融合单克隆抗体特异性针对小鼠AnxA2蛋白,可用于AnxA2转基因小鼠中AnxA2表达的检测,为深入研究AnxA2的功能提供了物质保障.