新基因PKHDL1产物Fibrocystin-L的抗体制备及其亚细胞定位的初步研究

• 作者: 丁振伟 付玉龙 吴冠青 戴宝贞 李兰 李奥 连培文
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: PKHDL1基因 Fibrocystin-L 多克隆抗体 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 78-81
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

目的:制备FPC-L蛋白的多克隆抗体,对PKHDLI基因产物进行初步的细胞生物学研究.方法:根据生物信息学分析结果,PCR扩增编码人类FPC-L的N端633L-768K的cDNA片段.将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生人类FPC-L抗原(hFL-N).纯化目的蛋白并制备兔抗FPC-L蛋白多克隆抗体.Western blot鉴定抗体特异性,并以间接免疫荧光法初步分析该蛋白在细胞内定位.结果:成功地构建了hFL-N片段原核表达载体,在大肠杆菌中实现表达,并制备了hFPC-L蛋白的多克隆抗体hFL-Np.通过生化和细胞学方法证实了该抗体针对FPC-L的特异性和揭示了该蛋白的亚细胞定位.结论:成功制备了高效价并具特异性的兔抗FPC-L蛋白多克隆抗体,并揭示了该蛋白主要表达于细胞质内,为进一步研究PKHDLI基因产物的生物功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	连培文		5	3	1.0	1.0
5	付玉龙		1	1	1.0	1.0
6	李奥		1	1	1.0	1.0
7	戴宝贞		1	1	1.0	1.0
8	丁振伟		1	1	1.0	1.0
9	李兰		1	1	1.0	1.0