过表达Rab7基因对LPS和Poly I:C活化的巨噬细胞RAW264.7中iNOS/NO的影响

• 作者: 刘帅 宋亮 王宁飞 王玉珍 蔡富娟 谢业功
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多聚胞苷酸 脂多糖 一氧化氮合酶 一氧化氮
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 497-501
• 分类号: R392.11
• 字数: 4809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.06.004

摘要

目的:通过建立稳定表达Rab7及其突变体的巨噬细胞系,分析稳定表达细胞系的生物学特性,研究Rab7及其突变体基因过表达后对LPS和Poly I:C刺激的巨噬细胞表达iNOS/NO的影响.方法:将Rab7及其突变体Rab7(T22N)的真核表达载体通过脂质体法转染RAW264.7细胞,G418选择性培养基筛选,建立稳定表达Rab7及Rab7T22N的细胞系.通过RT-PCR和Western blot方法鉴定稳定表达细胞系.通过观察细胞形态及MTT法分析稳定表达细胞系的生长特性.以LPS和Poly I:C刺激稳定表达细胞系,不同时间后检测NO和iNOS的表达量变化.结果:与转染空质粒的细胞相比,转染Rab7和Rab7T22N的细胞中Rab7的mRNA和蛋白水平都显著增高.Rab7过表达后引起细胞形态变化并显著抑制了细胞增殖,Rab7T22N过表达后促进细胞增殖.Rab7过表达后,巨噬细胞在LPS和Poly I:C刺激后分泌的iNOS 和NO显著降低,而Rab7T22N过表达后iNOS和NO的分泌又恢复.结论:成功建立了稳定表达Rab7及其突变体的细胞系.Rab7过表达后抑制了细胞增殖,抑制了Poly I:C和LPS刺激后巨噬细胞中NO和iNOS的表达.该研究为进一步阐明Rab7在TLRs信号通路中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宁飞	内蒙古农业大学生命科学学院	2	8	2.0	2.0
2	蔡富娟	内蒙古农业大学生命科学学院	2	7	2.0	2.0
3	刘帅	内蒙古农业大学生命科学学院	4	11	2.0	3.0
4	宋亮	内蒙古农业大学生命科学学院	2	4	1.0	2.0
5	谢业功		1	4	1.0	1.0
6	王玉珍	内蒙古农业大学生命科学学院	17	56	4.0	7.0