狂犬病病毒核酸RT-LAMP检测方法的建立

• 作者: 向华 向蓉 宣华 张健騑 陈晶 黄元
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 狂犬病病毒 RT-LAMP 检测
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 108-111
• 分类号: R373
• 字数: 2827字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.02.007

摘要

目的 建立RT-LAMP方法,实现对狂犬病病毒核酸的快速、灵敏、简便的检测.方法 针对狂犬病病毒的核衣壳蛋白基因(N基因)和大转录酶蛋白基因(L基因)中的高度保守区段分别设计了一套引物,建立了检测狂犬病病毒的快速一步式反转录～环介导恒温扩增(RT-LAMP)方法.样品提取总RNA后,加入BstDNA聚合酶、各种反应成分,于63℃恒温水浴箱中放置60min,80℃5min终止反应,加入荧光染料SYBR GREEN I,根据颜色变化肉眼判定结果.结果 两套引物对狂犬病病毒RNA进行RT-LAMP检测,均有良好的特异性,灵敏度均比RT-巢式PCR高10倍以上.结论 该方法简单、快速,不需电泳,利用染色剂肉眼判定结果,不需要大型仪器,能在70min内完成对狂犬病病毒RNA的检测,适用于可疑动物的快速检测,尤其适合基层使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张健騑	广东省农科院兽医研究所广东省兽医医公共卫生公共实验室	30	344	11.0	18.0
2	向华	广东省农科院兽医研究所广东省兽医医公共卫生公共实验室	22	153	8.0	11.0
3	黄元	广东省农科院兽医研究所广东省兽医医公共卫生公共实验室	6	23	3.0	4.0
4	陈晶	广东省农科院兽医研究所广东省兽医医公共卫生公共实验室	5	24	2.0	4.0
5	向蓉	广东省农科院兽医研究所广东省兽医医公共卫生公共实验室	3	20	2.0	3.0