放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白的提取及纯化

• 作者: 冯书章 孙宏晨 李毅 杨涛 郭学军
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 放线共生放线杆菌 LTB-FAP 提取 纯化
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 方法学
• 页码范围: 370-374
• 分类号: R379.1
• 语种: 中文

摘要

目的:对大肠杆菌表达的放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白LTB-FAP进行提取和纯化,为其用于牙周病的治疗提供理论依据.方法:将重组质粒pET28a/LTB和pET28a/LTB-FAP分别转化到大肠杆菌中进行表达,通过超声裂解法获得以包涵体形式表达的重组外源蛋白LTB-FAP;用2,4,6和8 mol·L-1尿素缓冲液对重组蛋白进行洗涤、溶解;然后用阴离子交换和凝胶过滤柱层析对重组蛋白进行纯化,采用薄层扫描仪对蛋白纯度进行测定.结果:目的包涵体蛋白经过3次4 mol·L-1尿素洗涤,6 mol·L-1尿素溶解后,经薄层扫描可获得纯度为60%的目的蛋白;经离子交换层析纯化,蛋白纯度可达约75%;Sepharose 6B行凝胶过滤层析获得了纯度可达90%的重组蛋白LTB-FAP.结论:阴离子交换和凝胶过滤柱层析的方法可提取、纯化重组蛋白LTB-FAP,获得的LTB-FAP可以用于免疫机体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙宏晨	吉林大学口腔医院儿童口腔科	194	754	13.0	16.0
2	李毅	吉林大学口腔医院儿童口腔科	35	132	6.0	10.0
3	郭学军	中国军事科学院军事兽医研究所分子细菌学研究室	2	3	1.0	1.0
4	冯书章	中国军事科学院军事兽医研究所分子细菌学研究室	2	3	1.0	1.0
5	杨涛	吉林省长春市儿童医院儿童口腔科	4	35	3.0	4.0