抗狂犬病病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 宫苗苗 曾妮 李刚 程朝飞 郭李平 黄华欣
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 狂犬病病毒 N蛋白 表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 866-870
• 分类号: R373.9
• 字数: 4296字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2011.10.003

摘要

目的 制备抗狂犬病病毒N蛋白单克隆抗体,为建立快速准确的狂犬病病毒抗原检测方法奠定基础.方法 将狂犬病病毒Flury LEP株N基因克隆至pGEX-6P-1表达载体中,将纯化后的pGEX-6P-1-RV-N蛋白免疫BAIB/c小鼠3次.取小鼠脾脏细胞和SP2/0细胞融合后,用pET-32a -RV-N重组蛋白作为筛选抗原,经3次亚克隆筛选后得到1D9、2B6、3C5、6B5及5F2 5株单克隆抗体细胞株.亚类鉴定结果表明,其中lD9、2B6、6B5 3株亚类为IgG1,3C5、5F2的亚类为IgM.间接ELISA方法检测2B6单抗细胞腹水效价可达1∶106.经Protein G亲和层析柱纯化和脱盐后可得到浓度为2.5 mg/mL的高纯度的单克隆抗体.其免疫荧光试验结果表明5株单克隆抗体均能特异地与狂犬病病毒结合.结论 制备的单抗具有良好的特异性和敏感性,为后期诊断方法的建立奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李刚	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	111	742	14.0	23.0
2	曾妮	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	10	67	4.0	8.0
3	宫苗苗	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	4	11	2.0	3.0
4	程朝飞	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	4	11	2.0	3.0
5	黄华欣	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	3	3	1.0	1.0
6	郭李平	中国农业大学动物医学院	2	9	2.0	2.0