原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析

• 作者: 周英妹 干丽君 林玲 熊建军 龚帧
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: USP22基因 启动子 报告基因
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 580-583
• 分类号: R730.3
• 字数: 3327字
• 语种: 中文
• DOI: CNKI:21-1227/R.20110705.1000.001

摘要

目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性.方法应用cDNA 5＇末端快速扩增(5′RACE)方法定位USP22基因转录起始点；在此基础上针对其5＇端非编码区处包括转录起始点在内的-2 828～+52片段进行PCR扩增,产物克隆入荧光素酶表达载体pGL3-Basic.重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染HepG2与Hela细胞,双荧光素酶活性检测确定其转录活性.结果成功确定USP22基因转录起始位点,酶切及测序结果证实USP22基因5＇端非编码区2 880 bp序列正确插入到荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic.重组质粒pGL3-USP22 promoter转染HepG2细胞和Hela细胞后,检测到荧光素酶的高表达(P＜0.05).结论 成功构建具有转录活性的USP22启动子片段,为进一步研究USP22表达调控机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊建军	九江学院基础医学院药理教研室	21	28	4.0	4.0
3	林玲	九江学院基础医学院药理教研室	12	48	4.0	6.0
4	龚帧	九江学院基础医学院药理教研室	21	58	4.0	6.0
7	干丽君	九江学院基础医学院药理教研室	19	35	3.0	4.0
8	周英妹	九江学院基础医学院药理教研室	2	8	2.0	2.0