适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子构建及其适用性鉴定

• 作者: 吕蓉 张舒亚 朱水芳 李俊毅 李想 潘良文 褚庆华 黄新
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: PCR RT73 标准分子 品系特异性检测 实时荧光PCR
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 76-83
• 分类号: Q78
• 字数: 5287字
• 语种: 中文

摘要

针对目前转基因产品检测标准物质缺乏的难题,构建适于转基因油菜RT73品系特异性检测的标准分子pEASY-RT73.其包含转基因油菜RT73品系3'端侧翼序列,油菜内标准基因HMG和PEP片段.对其在定性和定量检测中的适用性进行了实验室内部验证,结果表明,标准分子pEASY-RT173高度特异于转基因油菜RT73品系.以标准分子为标准品的普通PCR扩增中,3个目标片段的检测下限(LOD)均为10拷贝.实时荧光PCR检测的LOD均为25拷贝,定量下限(LOQ)均为50拷贝.以标准分子为标准品构建的标准曲线反应效率介于0.96-1.02间,相关系数均大于0.999.分别以PEP和HMG为内标准基因对5个盲样的测试结果显示,测量值与设定值间偏差(Bias)介于-14.13%-14.29%间,SD小于0.20,RSD小于18.0%.因此,标准分子pEASY-RT73可很好地替代植物来源阳性标准品用于转基因油菜Rt73及其来源产品品系特异性检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱水芳	中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所	135	1061	16.0	26.0
2	李想		18	126	7.0	10.0
3	潘良文		48	495	13.0	20.0
4	黄新	中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所	18	103	6.0	9.0
5	张舒亚		39	243	10.0	12.0
6	吕蓉		16	78	5.0	8.0
7	褚庆华		11	141	6.0	11.0
8	李俊毅	华东理工大学生物工程学院	3	11	2.0	3.0