pBV220/hIL-4优化表达及其包涵体复性研究

• 作者: 孙卫国 张灵霞 李国利 李邦印 熊志红 程小星
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人白细胞介素-4 优化表达 包涵体 生物活性
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 205-208,222
• 分类号: Q78
• 字数: 3935字
• 语种: 中文

摘要

旨在对人白细胞介素-4(hIL-4)上、下游序列进行优化设计,提高在原核系统中的表达量,并对表达的包涵体进行复性研究提高复性率.利用BioSun的RNA二级结构预测模块辅助设计hIL-4起始密码子(AuG)上、下游的序列,使局部二级结构的自由能满足高表达要求;根据pBV220栽体和原核系统的特点优化引物序列提高hIL-4原核表达量.优化hIL-4包涵体复性条件和方法,提高复性率和生物活性.结果显示,成功构建了pBV220/hIL-4高效表达栽体,原核表达的重组人IL-4占细茵总蛋白的35%以上,明显高于优化前表达量;经过复性研究hIL-4包涵体复性率可达到15%以上,生物活性鉴定发现,纯化的hhIL-4蛋白的比活等同或高于国外同类产品.影响原核表达的条件较多,对表达序列的优化设计可以大大提高蛋白的表达量.针对人IL-4基因序列的优化设计提高了人IL-4基因的表达,复性方法的改良提高了复性率和生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张灵霞	解放军第309医院结核病研究所	19	112	5.0	9.0
2	李国利	解放军第309医院结核病研究所	17	126	6.0	11.0
3	李邦印	解放军第309医院结核病研究所	11	50	3.0	6.0
4	程小星	解放军第309医院结核病研究所	35	111	5.0	7.0
5	孙卫国	解放军第309医院结核病研究所	15	23	2.0	3.0
6	熊志红	解放军第309医院结核病研究所	13	73	2.0	8.0