大鼠GLUT3启动子的克隆及其缺糖调控活性的测定

• 作者: 余舰 李军亮 李方成 蒋广义 许新科 郑传宜 郑眉光
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因,GLUT3 启动子 缺糖 荧光素酶报告基因 转录调控
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2147-2151
• 分类号: Q78
• 字数: 3103字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2011.11.020

摘要

目的:构建葡萄糖转运体3(GLUT3)启动子的报告基因,并在正常和缺糖情况下检测其转录活性.方法:使用生物信息学软件预测了GLUT3的启动子序列,长度1 292 bp,包含第1个外显子,通过PCR及双酶切方法,从大鼠全血基因组DNA中获得GLUT3基因编码序列,包含GLUT3启动子序列,然后克隆到报告基因pGL3-Basic载体上,构建GLUT3启动子的报告基因;用脂质体转染法将pGL3-GLUT3与胸腺嘧啶脱氧核苷激酶(pRL-TK)共转染入PC12细胞中,以pRL-TK载体作内参照,分别给予正常和缺糖培养,采用双萤光素酶报告系统评估GLUT3启动子的活性.结果:经PCR方法扩增出GLUT3启动子序列,测序与GenBank序列一致;转染后检测显示,该pGL3-GLUT3明显具有转录活性,而且在缺糖24 h情况下其双萤光素酶活性有明显升高.结论:成功构建出GLUT3启动子报告基因,pGL3-GLUT3表现出很好的缺糖诱导活性,缺糖24 h是研究pGL3-GLUT3在缺糖情况下转录调控很有意义的时间点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑传宜	海南医学院附属医院神经外科	14	128	4.0	11.0
2	郑眉光	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	24	72	6.0	7.0
3	李方成	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	42	199	8.0	11.0
4	李军亮	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	20	100	7.0	9.0
5	许新科	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	11	44	4.0	6.0
6	余舰	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	3	6	2.0	2.0
7	蒋广义	中山大学孙逸仙纪念医院神经外科	1	3	1.0	1.0