实时荧光定量PCR检测脂多糖对NR8383细胞TNF-α mRNA 的影响

• 作者: 丁成志 曾振国 熊东林 钱克俭
• 来源期刊: 实用临床医学
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量PCR NR8383细胞系 肿瘤坏死因子-α 脂多糖
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 基础与临床
• 页码范围: 1-3,6
• 分类号: R446.61
• 字数: 2067字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-8194.2011.04.001

摘要

目的 实时荧光定量PCR检测脂多糖(LPS)诱导NR8383肺泡巨噬细胞前后TNF-α mRNA的表达情况.方法 体外培养的肺泡巨噬细胞系NR8383分成LPS刺激组和PBS(磷酸盐缓冲液)对照组,LPS终浓度为1 μg·mL-1,共培养2 h后,TRIzol法提取细胞总RNA,SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测细胞TNF-α mRNA的表达,结合管家基因β-Actin进行相对定量分析.结果 荧光定量PCR未发现非特异性扩增.与对照组比较,LPS刺激组细胞TNF-α mRNA上调了124.1倍,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 用于本研究TNF-α mRNA的荧光定量PCR检测体系特异性好,结果可靠,为进一步实验奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱克俭	南昌大学第一附属医院重症医学科	43	243	10.0	13.0
2	熊东林	深圳市第六人民医院疼痛科	21	124	7.0	10.0
3	丁成志	南昌大学第一附属医院重症医学科	11	75	6.0	8.0
4	曾振国	南昌大学第一附属医院重症医学科	30	226	10.0	13.0