牛Nramp1基因启动子的克隆及其活性分析

• 作者: 仲跻峰 何洪彬 侯明海 孙涛 张利博 王洪梅 王玲玲 王长法
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛Nramp1基因 启动子活性 调控区 LPS诱导
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 1022-1028
• 分类号: S823
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.05.020

摘要

[目的]牛Nramp1基因是主要的抗病候选基因,但其转录调控的分子机制尚不清楚.本研究欲确定牛Nramp1基因的启动子区域,找到启动子核心序列和主要的调控区,探索Nramp1基因表达机制.[方法]采用基因克隆、DNA测序、半定量RT-PCR和荧光素酶报告基因系统等技术手段,构建牛Nramp1基因5'侧翼区长片段及固定3'端的不同节段的pEGFP-N1和/或pGL3重组质粒,分别转染293T和RAW264.7细胞,并进行脂多糖(LPS)诱导,对不同片段的启动子活性进行定性和定量测定.[结果]牛Nramp1基因5'侧翼区长片段具有较强的启动子活性,+58--89区域具有基本的启动子功能,+58--1748启动子活性最强.进一步研究表明,-89--205bp区域、-278--1495bp区域存在着正调控元件,在-205--278bp区域内存在着负调控元件;另外,LPS能显著增强启动子活性,其诱导牛Nramp1基因的表达具有细胞特异性和剂量依赖性.[结论]成功构建了含推测的牛Nramp1基因启动子片段的重组报告基因载体,确定了启动子核心区域和主要的调控区域.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪梅	山东省农业科学院奶牛研究中心	101	626	12.0	18.0
2	王长法	山东省农业科学院奶牛研究中心	107	675	13.0	18.0
3	仲跻峰	山东省农业科学院奶牛研究中心	137	888	15.0	20.0
4	侯明海	山东省农业科学院奶牛研究中心	50	248	9.0	13.0
5	何洪彬	山东省农业科学院奶牛研究中心	59	320	10.0	13.0
6	王玲玲	山东省农业科学院奶牛研究中心	11	101	7.0	10.0
7	孙涛	山东省农业科学院奶牛研究中心	11	46	3.0	6.0
8	张利博	山东省农业科学院奶牛研究中心	2	25	2.0	2.0