幽门螺杆菌重组1188蛋白的表达

• 作者: 杨致邦 韩飞
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 螺杆菌,幽门 hp1188基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 218-220,223
• 分类号: R3
• 字数: 3340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2011.03.004

摘要

目的 表达幽门螺杆菌(H.pylori)重组1188蛋白,为研究幽门螺杆菌的黏附机制奠定基础.方法 用聚合酶链反应(PCR)技术从H.pylori标准株NCTC 11637的基因组DNA中扩增hp1188基因片段,插入原核表达载体pQE-30,构建重组载体pQE30-hp1188,经DNA测序分析确认后,转化大肠杆菌DH5α,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.Ni2+-NTA树脂纯化表达蛋白,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达形式和表达量.结果 重组表达质粒pQE30-hp1188构建成功,所得序列完整,插入的基因片段全长810 bp,与基因文库中的hp1188基因同源性达98%.SDS-PAGE显示表达产物相对分子质量约为30.6 kD,与预期一致,蛋白表达量占全菌总蛋白的47%,上清液和沉淀中均有表达,重组蛋白纯化后纯度达90%以上. 结论 成功克隆hp1188基因,并在大肠杆菌DH5α中获得高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨致邦	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	119	522	12.0	17.0
2	韩飞	重庆三峡中心医院微生物免疫科	8	29	3.0	5.0