重组人早孕因子的表达与纯化

• 作者: 冯华 张改平 权凯 杜晓明 王丽 王林林 王爱萍 郭军庆
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 医学
• 关键词: 早孕因子 原核表达 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2011,（14）
• 所属期刊栏目: 兽医-研究报告
• 页码范围: 40-44
• 分类号: R714.1
• 字数: 4423字
• 语种: 中文

摘要

早孕因子(EPF)是具有免疫抑制和生长调节活性的妊娠相关蛋白,为目前最早确认妊娠的生化指标之一.为获得人早孕因子重组蛋白,通过PCR技术扩增人早孕因子基因,克隆入原核表达载体pGEX-6p-1,与GST基因相融合,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以SDS-PAGE和Western b1ot分析重组蛋白的表达,通过GST树脂纯化表达蛋白.结果成功构建重组表达质粒pGEX6P-EPF,在大肠杆菌中诱导表达了GST-EPF融合蛋白,表达蛋白分子量为373 kDa,并能被抗GST单克隆抗体特异识别,GST亲和层析纯化,制备了EPF重组蛋白.